- 赫西儀器誠邀請您參加第二十屆北京分析測試學術(shù)報告會暨展覽會(BCEIA 2023)
- JJF 2004-2022 醫(yī)用離心機校準規(guī)范:保證醫(yī)學檢測準確性的關(guān)鍵
- 赫西儀器誠摯邀請您參加2023第七屆廣州國際檢驗醫(yī)學與體外診斷產(chǎn)品暨體檢中心展會
- 赫西儀器經(jīng)銷商交流大會圓滿結(jié)束|此行不負相遇,未來繼續(xù)前行
- 赫西動態(tài):經(jīng)銷商與公司團建,共筑成功之夢
- 赫西儀器邀您參加2023年慕尼黑上海分析生化展,探索前沿科技
- 醫(yī)用離心機:革新醫(yī)學實驗的利器,引領(lǐng)醫(yī)學科研進步!
- 赫西儀器誠邀您參加第二十一屆世界制藥原料中國展
- 推動離心技術(shù)發(fā)展 赫西儀器新品亮相CISILE
- 赫西儀器:2023年五一放假通知
50 ml 離心管在離心時的最高轉(zhuǎn)速都低于12000rpm,赫西儀器出產(chǎn)的3H系列高速冷凍離心機特別配置了新型的專用于組織培養(yǎng)管的高速轉(zhuǎn)頭,并專門定制了高強度的50ml 錐底管。用這種轉(zhuǎn)頭分離細胞器,離心時間短,分離效果好。
設(shè)備:赫西3H系列冷凍高速離心機,6×50ml高速轉(zhuǎn)頭, 50 ml 離心管。
臺式高速冷凍離心機3H20RI
操作步驟:
1.成年鼠肝勻漿2000xg(約4000rpm) 離心15分,4℃(6×50ml高速轉(zhuǎn)頭)
2.沉淀用1mM NaHCO3 稀釋再在4000rpm離心15分,4℃
3.沉淀按濕重1g/ml NaHCO3 稀釋后配成68%蔗糖液,置于離心管下部,上部用42%蔗糖液
4.6×50ml高速轉(zhuǎn)頭,42200xg(18000rpm),4℃離心90分鐘,加速“5”減速“5”
5.離心后,粗制細胞膜在42%與68%蔗糖液之間形成
6.粗制細胞膜吸出后,用1mM NaHCO3 稀釋后,再以2000xg(約4000rpm)4℃離心30分,重復二次
7.去除上清液沉淀,再用1mM NaHCO3 稀釋,在50ml 離心管中,從底部依次向上鋪設(shè):68%蔗糖液(稀釋樣品配成)、48%蔗糖液、42%蔗糖液。
8.鋪好后再次離心,6×50ml高速轉(zhuǎn)頭,18000rpm,4℃,90分鐘,加速“5”減速“5”
9.離心結(jié)束后可以看出細胞膜分布在42%與48%蔗糖液之間
成果:階梯形蔗糖梯度在50ml 離心管中用高速冷凍離心機分離亞細胞構(gòu)造(膜、線粒體、溶酶體、高爾基復合體、微體等),由于開發(fā)了高強度的組培養(yǎng)管而變得更為可行。
通過上例,我們可以選擇不同的蔗糖階梯度來分離細胞器,可以得到相當高的純度。除了蔗糖梯度以外,用Percoll及Nycodenz 的自形成、予形成或階梯梯度分離亞細胞構(gòu)造,近年來被廣泛應用。
- 上一篇:離心技術(shù)縱橫談
- 下一篇:如何安全使用離心機?
- 相關(guān)鏈接:
- 高速離心機與高速冷凍離心機的區(qū)別
- 高速冷凍離心機操作流程和特點
- 低速冷凍離心機和高速冷凍離心機區(qū)別
- 高速冷凍離心機主要用途及實驗時參考轉(zhuǎn)速
- 高速冷凍離心機及應用領(lǐng)域
- 醫(yī)用高速冷凍離心機的工作原理和用途
- 冷凍離心機分類和高速冷凍離心機特點
- 高速冷凍離心機關(guān)鍵材料的開發(fā)及成套技術(shù)應用通過驗收
- 智能高速冷凍離心機產(chǎn)品標準編制說明